1

Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu chế tạo que thử sắc ký miễn dịch nano từ tính để phát hiện nhanh kháng nguyên NS1 của virut Dengue gây bệnh sốt xuất huyết trên địa bàn Hà Nội

2

3

4

Mã số nhiệm vụ (nếu có): 01C-08/01-2020-3

5

Tên tổ chức chủ trì: Bệnh viện Quân y 103.

6

Cơ quan chủ quản: Bộ Quốc phòng

7

Chủ nhiệm nhiệm vụ: ThS Đào Văn Thắng

8

Danh sách cá nhân tham gia nhiệm vụ: TS Nguyễn Thanh Xuân TS Đỗ Như Bình Nguyễn Thanh Xuân Lê Văn Nam Nguyễn Minh Nam Trịnh Công Điển Đỗ Thị Lệ Quyên Nguyễn Văn Trường

9

Mục tiêu nghiên cứu:

10

Tóm tắt nội dung nghiên cứu chính: Nội dung 1: Nghiên cứu tổng quan
Nội dung 2: Nghiên cứu tạo kháng nguyên tái tổ hợp NS1 chung cho 4 chủng virus Dengue 1, 2, 3 và 4
Nội dung 3: Nghiên cứu tạo kháng thể đơn dòng kháng NS1
Nội dung 4: Nghiên cứu que thử sắc ký miễn dịch từ tính phát hiện nhanh kháng nguyên NS1 của vi rút Dengue với kháng thể tự sản xuất ở quy mô phòng thí nghiệm
Nội dung 5: Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu của thử nghiệm phát hiện nhanh NS1 vi rút dengue bằng que thử từ tính
Nội dung 6: Đề xuất các điều kiện triển khai sử dụng bộ que thử nghiên cứu tại một số cơ sở y tế trên địa bàn Hà Nội

11

Lĩnh vực nghiên cứu: Khoa học y, dược

12

Mục tiêu kinh tế xã hội của nhiệm vụ:

13

Phương pháp nghiên cứu: Các kỹ thuật sẽ được sử dụng trong đề tài này bao gồm:
- Phương pháp Thiết kế mồi
- Phương pháp tách chiết DNA tổng số
- Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction)
- Phương pháp tách dòng bằng vector đặc hiệu
- Phương pháp đọc trình tự DNA trên máy đọc trình tự tự động và phân tích kết quả bằng phần mềm chuyên dụng
- Phản ứng nối ghép gen
- Phương pháp biến nạp DNA plasmid vào tế bào khả biến Escherichia coli
- Phương pháp tách chiết DNA plasmid
- Phương pháp cắt plasmid bằng enzym giới hạn
- Tinh sạch phân đoạn DNA
- Phương pháp biểu hiện gen NS1 trong chủng E. coli
- Phương pháp điện di DNA trên gel agarose
- Phương pháp điện di protein trên gel polyacrylamide
- Phương pháp tinh sạch protein tái tổ hợp
- Phương pháp định lượng protein theo phương pháp Bradford
- Phương pháp chọn lựa các lô chuột đảm bảo tiêu chuẩn để thử nghiệm độc tố và tính toán các nồng độ LD50 thích hợp để xác định nồng độ ngưỡng
-
- Phương pháp gây miễn dịch trên chuột
- Tạo dòng tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng
- Sàng lọc dòng tế bào lai tiết kháng thể đơn dòng
- Tách dòng (cloning) tế bào lai hybridoma
- Thu lượng lớn kháng thể đơn dòng từ dịch báng chuột
- Phương pháp kiểm tra kháng thể đơn dòng bằng ELISA

14

Sản phẩm khoa học và công nghệ dự kiến:

15

Địa chỉ và quy mô ứng dụng dự kiến: Phạm vi ứng dụng: Kết quả nghiên cứu của đề tài có thể được đưa ra áp dụng trong các lĩnh vực đào tạo và hỗ trợ chẩn đoán. Địa chỉ dự kiến ứng dụng: Bệnh viện Đa khoa Đống Đa; Bệnh viện Đa khoa Hà Đông

16

Thời gian thực hiện: 24 tháng (từ 01/10/2020 đến 01/09/2022)

17

Kinh phí được phê duyệt: 0 triệu đồng
trong đó:

18

Quyết định phê duyệt: số Số 4969/QĐ - UBND ngày 05 tháng Tháng 11 năm 2020

19

Hợp đồng thực hiện: số ngày 01 tháng Tháng 1 năm 1970