Các nhiệm vụ khác
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  13079543
  • Kết quả thực hiện nhiệm vụ

Tạo chủng vi khuẩn Eschericchia coli biểu hiện đồng thời Enzym Acyl Thioesterase 2 (ALT2) và Methylketone Synthase 1 đột biến (ShMKS1G129W) có khả năng tổng hợp các 2-Methylketone chuỗi Carbon ngắn

Trung tâm Phát triển Khoa học và Công nghệ Trẻ

UBND TP. Hồ Chí Minh

Tỉnh/ Thành phố

Khuất Lê Uyên Vy

Hoá sinh; phương pháp nghiên cứu hoá sinh

01/12/2014

01/12/2017

TP. Hồ Chí Minh

57 tr. + phụ lục

2-Methylketone là những hợp chất hữu cơ có chứa nhóm chức keto ở nguyên tử carbon thứ hai. Nhóm hợp chất này là chất tạo hƣơng quan trọng trong ngành công nghiệp thực phẩm và mỹ phẩm. Các nhà khoa học hiện nay đang hƣớng tới việc ứng dụng methylketone để sản xuất nhiên liệu sinh học, tuy nhiên, hỗn hợp các methylketone chuỗi trung bình (C11 và C13) có trị số kích nổ cetan cao nhƣng nhiệt độ nóng chảy cũng tƣơng đối cao, điều này gây bất lợi cho việc sản xuất nhiên liệu lạnh từ methylketone. Hỗn hợp các methylketones chuỗi ngắn (C7 và C9) với điểm nóng chảy thấp hơn sẽ phù hợp để pha trộn với dầu diesel. Hướng tới sự tổng hợp các methylketone chuỗi ngắn hoàn toàn bằng con đường chuyển hóa sinh học, trong nghiên cứu này, chúng tôi tạo chủng vi khuẩn E. coli biểu hiện đồng thời enzyme acyl thioesterase 2 (ALT2) và methylketone synthase 1 đột biến (ShMKS1G129W) có khả năng tổng hợp các 2-methylketone chuỗi carbon ngắn. Enzyme ALT2 có khả năng thủy phân liên kết thioester của 3-ketoacyl-ACP ngắn chuỗi – một hợp chất trung gian trong sinh tổng hợp acid béo – thành các 3-ketoacid chuỗi ngắn tƣơng ứng. Enzyme ShMKS1G129W – phiên bản đột biến của enzyme ShMKS1, trong đó, amino acid Glycine ở vị trí 129 được thay thế thành Tryptophan – sẽ khử carboxyl các 3-ketoacid chuỗi ngắn thành 2- methylketone chuỗi ngắn. Kết quả phân tích so sánh ảnh hƣởng của các điều kiện nuôi cấy cảm ứng đến sự biểu hiện của protein ShMKS1G129W và ALT2 bằng SDS-PAGE cho thấy 2 protein này biểu hiện tốt ở pha tan khi đƣợc cảm ứng với IPTG 0.25 mM ở 18oC trong 5 giờ hoặc 16 giờ. Bằng kỹ thuật sắc ký khí với đầu dò FID (GC-FID), phần lớn methylketone sinh ra trong dịch môi trường nuôi cấy chủng E. coli biểu hiện đồng thời hai enzyme ALT2 và ShMKS1G129W đƣợc xác định là 2-heptanone (C7) và 2-nonanone (9C). ABSTRACT.
 

Vi khuẩn Eschericchia coli; Enzym Acyl Thioesterase 2; Methylketone Synthase 1; 2-Methylketone; Chuỗi Carbon ngắn

24 Lý Thường Kiệt, Hà Nội

HCM-0177-2018