Các nhiệm vụ khác
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  13079543
  • Kết quả thực hiện nhiệm vụ

Xây dựng quy trình phân type rs1801133 (C677T) dựa trên kỹ thuật real-time PCR kết hợp phân tích HRM

Trung tâm Phát triển Khoa học và Công nghệ Trẻ

UBND TP. Hồ Chí Minh

Tỉnh/ Thành phố

KS. Trần Thị Nhựt Linh

Kỹ thuật y học

01/01/2017

01/12/2017

2017

TP. Hồ Chí Minh

48 tr. + phụ lục

rs1801133 là một đa hình đơn nucleotide nằm trên gen MTHFR thuộc nhiễm s c thể số 1 ở người. Các alen của SNP này ảnh hưởng tới hoạt tính của enzyme MTHFR. Người mang genotype C/T của SNP này có hoạt tính enzyme bị giảm còn 66% và người mang genotype T/T có hoạt tính bị giảm còn 25%. Khi hoạt tính enzyme MTHFR bị giảm sẽ dẫn đến tình trạng gia tăng homocysteine trong máu. Có rất nhiều bằng chứng về sự liên quan giữa tình trạng gia tăng homocysteine và các bệnh ở người như bệnh tim mạch, thần kinh, bất thường thai nhi, vô sinh, ung thư. Trong nghiên cứu này, xây dựng một quy trình phân tử nhằm phân type rs1801133 sử dụng kỹ thuật real-time HRM. Quy trình này được sử dụng để chẩn đoán nguyên nhân phân tử của chứng tăng homocysteine trong máu của các chứng bệnh đã đề cập ở trên. Ngoài ra, nó cũng được sử dụng như một công cụ để nghiên cứu sự liên quan giữa SNP này với các chứng bệnh khác ở người. Thiết kế thành công các cặp primer nhằm phân type rs1801133 cũng như để giải trình tự nucleotide SNP này. Khảo sát nồng độ MgCl2 thích hợp để phân biệt 3 dạng genotype tương ứng của rs1801133. Khảo sát các đặc tính kỹ thuật của quy trình như độ đặc hiệu kỹ thuật, độ lặp lại, độ tái lập và các kết quả thu nhận được là tốt. Cuối cùng, áp dụng quy trình real-time PCR HRM phân type rs1801133 trên 100 mẫu lâm sàng có so sánh một phần với kỹ thuật giải trình tự nucleotide Sanger. Kết quả thu nhận được cho thấy quy trình phân type hiệu quả rs1801133 trên các mẫu thực tế, điều này cho thấy quy trình này hoàn toàn có thể được ứng dụng để phân type rs1801133 trong thực tế lâm sàng.
 

Phân type rs1801133; Kỹ thuật real-time PCR; Phân tích HRM; Quy trình

24 Lý Thường Kiệt, Hà Nội

HCM-0195-2018