HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
Lọc theo danh mục
liên kết website
Lượt truy cập
Lượt truy cập :
14,995,134
62
Các công nghệ xử lý sinh học, xúc tác sinh học; lên men
BB
Thái Hạnh Dung, Trịnh Thị Minh, Ngô Ánh Ngọc, Nguyễn Thị Ngân Giang, Trần Văn Tuấn; Trần Văn Tuấn(1);
Bước đầu nghiên cứu chuyển gen vào chủng nấm sợi thực phẩm Aspergillus luchuensis AL1 sử dụng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens
A preliminary study on Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of the food filamentous fungus Aspergillus luchuensis AL1
Khoa học và Công nghệ Việt Nam
2024
9B
12-17
1859-4794
Aspergillus luchuensis, Chuyển gen nhờ vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens, Gen kháng hygromycin B, Huỳnh quang xanh (GFP).
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (ATMT), Aspergillus luchuensis, Green fluorescent protein (GFP), Hygromycin B antibiotic resistance gene.
Aspergillus luchuensis là loài nấm sợi nổi tiếng trong công nghiệp sản xuất rượu truyền thống tại Nhật Bản. Đây là loài nấm sợi an toàn và không sinh độc tố nấm. Nấm sợi A. luchuensis có khả năng sử dụng nhiều loại cơ chất giá rẻ và sinh tổng hợp nhiều loại enzyme có giá trị như amylase, protease, xylanase. Tuy nhiên, các nghiên cứu về cải biến di truyền ở A. luchuensis vẫn còn tương đối hạn chế, đặc biệt là tại Việt Nam. Nghiên cứu này giới thiệu chủng A. luchuensis AL1 có nguồn gốc từ thực phẩm, được phân loại dựa trên đặc điểm hình thái và phân tích trình tự ba vùng gen độc lập gồm ITS của rDNA, gen β-tubulin (benA) và calmodulin (CaM). Bước đầu nghiên cứu này đã thành công trong chuyển gen vào A. luchuensis AL1 nhờ sử dụng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens và gen kháng hygromycin B. Hiệu suất chuyển gen đạt 40 thể chuyển gen/106 bào tử nấm và không xuất hiện các khuẩn lạc dương tính giả. Với phương pháp chuyển gen này, chủng A. luchuensis AL1 đã được tích hợp thành công thêm gen mã hóa protein huỳnh quang xanh (GFP) dưới sự điều hòa của promoter gpdA từ nấm Aspergillus nidulans. Phân tích các chủng chuyển gen GFP dưới kính hiển vi huỳnh quang cho thấy sự biểu hiện mạnh của protein GFP ở toàn hệ sợi của nấm.
Aspergillus luchuensis is a filamentous fungus renowned in the traditional alcohol production industry in Japan. This species has been proven to be safe and does not produce fungal toxins. The A. luchuensis fungus is capable of utilising various inexpensive substrates and synthesising many valuable enzymes such as amylase, protease, and xylanase. However, research on genetic modification in A. luchuensis remains relatively limited, especially in Vietnam. This study introduced an A. luchuensis AL1 strain derived from food, which was classified based on morphological characteristics and sequence analysis of three independent gene regions, including the ITS of rDNA, β-tubulin (benA) gene, and calmodulin (CaM) gene. Initial research on gene transfer into A. luchuensis AL1 using Agrobacterium tumefaciens and the hygromycin B resistance gene has been successful. The efficiency of genetic transformation reached 40 transformants per 106 fungal spores, and no false-positive colonies were observed. With this gene transfer method, the gene encoding green fluorescent protein (GFP), regulated by the gpdA promoter from Aspergillus nidulans, was successfully transferred into the A. luchuensis AL1 strain. Analysis of the GFP-tagged transformants under a fluorescence microscope showed strong expression of the GFP protein in the fungal mycelia.
TTKHCNQG, CVv 8
Xem toàn văn