HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
Lọc theo danh mục
liên kết website
Lượt truy cập
Lượt truy cập :
14,852,614
62
Các công nghệ xử lý sinh học, xúc tác sinh học; lên men
BB
Chu Thị Bích Phượng; Phan Thị Phượng Trang(1);
Phát triển vector biểu hiện mang promoter Pgrac100 được cảm ứng bởi IPTG và sáp nhập gen gfp+ vào bộ gen vi khuẩn Bacillus subtilis tại locus lacA
Development of expression vector with the Pgrac100 promoter induced by IPTG and integrated gfp+ gene into Bacillus subtilis genome at lacA locus
Khoa học và Công nghệ Việt Nam
2024
1B
75-80
1859-4794
Bacillus subtilis, lacA, Pgrac100, sáp nhập, Vector cảm ứng IPTG.
Bacillus subtilis, Integrative, Isopropulβ-D- 1-thiogalactopyranoside-inducible vector, lacA locus, Pgrac100.
Bacillus subtilis là một loại vi khuẩn gram dương có nhiều đặc điểm thuận lợi trong sản xuất protein tái tổ hợp ở các lĩnh vực công nghiệp, nông nghiệp, y dược và thực phẩm. Nghiên cứu được thực hiện nhằm phát triển hệ thống biểu hiện cảm ứng chứa promoter Pgrac100 được sáp nhập tại vị trí lacA trong bộ gen của vi khuẩn B. subtilis. Kết quả cho thấy, promoter Pgrac100 có thể kiểm soát chặt chẽ sự biểu hiện protein mục tiêu trong hệ thống sáp nhập với tỷ lệ cảm ứng lần lượt đạt 3,3, 7,6 và 10,8 sau 4 giờ nuôi cấy với chất cảm ứng biểu hiện protein (Isopropulβ-D- 1-thiogalactopyranoside - IPTG) ở các nồng độ 0,01, 0,1 và 1,0 mM. Thời gian cảm ứng và nồng độ IPTG có ảnh hưởng quan trọng đến hiệu quả biểu hiện protein mục tiêu. Sau 4 giờ nuôi cấy cảm ứng với 0,1 mM IPTG, chủng B. subtilis sáp nhập mang promoter Pgrac100 cho hiệu quả biểu hiện protein cao nhất với lượng GFP chiếm 13% protein tổng số tế bào. Hệ thống vector sáp nhập chứa promoter Pgrac100 có tiềm năng ứng dụng trong nghiên cứu cơ bản và sản xuất công nghiệp.
Bacillus subtilis is a prospective gram - positive bacterium that offers an opportunity for the production of recombinant proteins in the pharmaceutical, agricultural, industrial, and food industries. The goal of this study was to develop an integrative inducible expression system by incorporating the Pgrac100 promoter into the lacA locus of the B. subtilis genome. The results showed that the Pgrac100 promoter was able to strictly control the expression of the target protein, with induction factors of 3.3, 7.6, and 10.8 after 4 hours under induction with 0.01, 0.1, and 1 mM Isopropulβ- D-1-thiogalactopyranoside (IPTG), respectively. The duration of induction and the concentration of IPTG had significant effects on the efficacy of target protein expression. Specifically, when induced with 0.1 mM IPTG after 4 hours, there was a significant rise in GFP expression, accounting for 13% of the total cellular protein. Our new vector system provided more options for the production of recombinant proteins in basic research and industrial applications.
TTKHCNQG, CVv 8
Xem toàn văn