Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  14,853,784

Hoá sinh; phương pháp nghiên cứu hoá sinh

Lê Dương Vương; Lê Thị Tường Vy; Phan Thị Phượng Trang; Nguyễn Đức Hoàng; Phan Thị Phượng Trang(1)

Tinh chế và hoạt tính của Human rhinovirus 3C protease dung hợp với GST-tag ở đầu N và His-Tag ở đầu C được biểu hiện trong Escherichia coli.

Purification, and activity of human Rhinovirus 3C protease fused with N-terminal GST-tag and C-terminal His-tag (GST-HRV3C-His) expressed in Escherichia coli

Tạp chí Khoa học ( Đại học Sư phạm TP. Hồ Chí Minh)

2019

3

162-173

1859-3100

Tinh sạch; Human rhinovirus 3C protease; GST-HRV3C-His

Rhinovirus 3C; GST-HRV3C-His; Escherichia coli

Human rhinovirus 3C protease (HRV3C) là một trong những công cụ phổ biến nhất để loại bỏ đuôi dung hợp trong quá trình tinh chế. Protease này thường được tạo ra ở dạng GST-HRV3C nhưng chưa có nghiên cứu nào về dạng dung hợp GST-HRV3C-His. Nghiên cứu này làm rõ quá trình tiến hành tinh chế GST-HRV3C-His được biểu hiện trên E. coli, kiểm tra hoạt tính và ứng dụng của nó. GST-HRV3C-His đã được thu nhận được với độ tinh sạch 86,6% (với cột tinh chế HisTrap) và 96,8% (với cột tinh chế GST). hoạt tính riêng của GST-HRV3C-His được xác định ở khoảng 4500 U/mg. protease này được ừng dụng trong quá trình tinh chế các protein khác mang trình tự nhận dạng đặc hiệu của HRV3C (LEVLFQ/GP) dựa trên đuôi dung hợp His hoặc GST.

The Human rhinovirus 3C protease (HRV3C) is one of the most effective enzymes for removing fusion tag in purification process. This protease is often produced as fusion form GSTHRV3C but there is no study about the fusion form GST-HRV3C-His. In this study, researchers conducted the purification GST-HRV3C-His expressed in E. coli,checked the activity and investigated its application. GST-HRV3C-His could be purified using His-tag column with 86.6% purity and GST column with 96.87%. The specific activity of GST-HRV3C-His was demonstrated to be about 4500 U/mg and its application in the purification of another proteins carrying HRV3Cspecific recognition sequence, LEVLFQ¯GP based on His-tag or GST-tag was also proved in this study.

TTKHCNQG, CTv 138