Các nhiệm vụ khác
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  14,994,740
  • Kết quả thực hiện nhiệm vụ

106-NN.04-2014.75

2018-53-366

Phát triển và ứng dụng các vector nhị thể thế hệ mới phục vụ cải biến di truyền các loài nấm sợi thông qua phương pháp chuyển gen nhờ vi khuẩn Agrobacterium

Trường Đại học Khoa học Tự nhiên

Đại học Quốc gia Hà Nội

Quốc gia

TS. Trần Văn Tuấn

TS. Trần Thị Thanh Huyền, TS. Lê Hồng Điệp, TS. Phạm Đức Ngọc, TS. Mai Thị Đàm Linh; Trần Văn Tuấn(1)Mai Thị Đàm Linh(2)Trần Văn Tuấn(3)

Công nghệ sinh học

03/2015

12/2017

2018

Hà Nội

126 tr.+phụ lục

Chọn lọc và nuôi cấy 4 loài nấm sợi Penicillium chrysogenum, Aspergillus oryzae; Aspergillus niger. Penicillium digitatum trên các môi trường thí nghiệm phù hợp cho chuyển gen. Đánh giá mức độ mẫn cảm của nấm sợi với một số loại kháng sinh (hygronmycin, nourseothricin, phlemycin) hoặc với chất trợ dưỡng như uridine 5-photphate để phục vụ cho việc thiết kế các vector nhị thể phù hợp với từng loài. Đánh giá hiệu quả chuyển gen vào các nấm nghiên cứu bằng phương pháp dùng A. tumefacines qua các thông số tỉ lệ vi khuẩn Agrobacterium/ bào tử nấm, thời gian đồng nuôi cấy, thời gian lưu trữ của báo tử nấm, nồng độ chất cảm ứng acetosyringone… Đánh giá hiệu quả biểu hiện gen ở nấm của các vector nhị thể thế hệ mới thông qua biểu hiện gen mã hóa protein huỳnh quang xanh GFP hoặc huỳnh quang đỏ DsRed. Tạo 1 bộ sưu tập các thể đột biến ngẫu nhiên của nấm P. chrydogenum để sàng lọc các gen liên quan đến sinh penicillin, 2 bộ sưu tập của A. oryzae và A. niger để sàng lọc các gen kiểm soát quá trình sinh tổng hợp enzym như phytase. Ứng dụng các vector nhị thể mới phát triển để tiến hành xóa bỏ (deletion) hoặc ức chế biểu hiện (silencing) đối với ít nhất 1-2 gen liên quan đến sinh tổng hợp kháng sinh penicillin hoặc hình thành bào tử. Điều tra kiểu hình của các thể đột biến xóa/silencing với đối chứng là chủng nấm hoang dại (wild type) và thể bổ trợ tương ứng (thể đột biến được bổ trợ với một bản gen đích nhằm phục hồi tính trạng ban đầu). Xóa bỏ (deletion) hoặc ức chế biểu hiện (silencing) đối với ít nhất 1-2 gen liên quan đến quá trình gây bệnh hoặc biệt hóa cấu trúc của nấm Penicillium digitanum. Điều tra kiểu hình của các thế hệ đột biến xóa/silencing và vai trò của các gen tương ứng đối với khả năng gây bệnh trên cam. Kết quả sẽ được so sánh với đối chứng là chủng nấm hoang dại (wild type) và thể bổ trợ.

Vector nhị thể; Cải biến; Di truyền; Chuyển gen; Vi khuẩn; Agrobacterium

24 Lý Thường Kiệt, Hà Nội

14896