BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Các nhiệm vụ khác
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  14,944,480
  • Kết quả thực hiện nhiệm vụ

Nghiên cứu quy trình tinh sạch Exopolysaccharide từ môi trường nuôi cấy Ophiocordyceps sinensis bổ sung dầu ô liu và khảo sát hoạt tính sinh học của chúng

Trung tâm Phát triển Khoa học và Công nghệ Trẻ

UBND TP. Hồ Chí Minh

Tỉnh/ Thành phố

ThS. Lê Thị Thúy Hằng

;

Hoá sinh; phương pháp nghiên cứu hoá sinh

01/2017

12/2017

2017

TP. Hồ Chí Minh

78 tr.

Sử dụng thiết kế Plackett-Burman để kiểm tra mức độ ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng khác nhau lên quá trình tạo EPS. Trong đó, dầu ô liu, saccharose và peptone là ba yếu tố có tác động mạnh nhất. Thiết kế thí nghiệm theo phương pháp đáp ứng bề mặt Box-Behnken đã thực hiện và tìm ra giá trị tối ưu của ba yếu tố gồm dầu ô liu (5,27 %), saccharose (48,69 g/L) và peptone (6,77 g/L) cho khả năng tổng hợp EPS đạt 6,06 g/L. Sau đó, chúng tôi xây dựng quy trình tách chiết EPS từ môi trường nuôi cấy tối ưu bổ sung dầu ô liu bằng phương pháp cô quay chân không ở 500C để cô đặc dịch nuôi cấy, loại dầu ra khỏi dịch nuôi cấy bằng dung môi hữu cơ Petroleum ether. Kết quả cho thấy sau khi loại dầu, hàm lượng EPS thu được là 0,0171g/ml và phần trăm bắt gốc tự do ABTS+ (55,67%) tăng 1,64 lần so với phần trăm bắt gốc tự do của mẫu EPS không được loại dầu (33,88%). Sau đó tủa EPS bằng Ethanol 960 theo tỉ lệ 1:4 (v/v), loại protein bằng phương pháp enzyme protease 20 UI/ml cho kết quả tốt hơn phương pháp TCA và Sevag. Phương pháp Enzyme có khả năng loại protein cao nhất (chỉ còn 1,57 % lượng protein) và hàm lượng polysaccharide cao nhất (69,2%) (p < 0,05) mà không làm ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học của EPS, cụ thể là khả năng bắt gốc tự do ABTS+ (68,98%). Sau khi thu nhận EPS thô, chúng tôi tiến hành sắc ký lọc gel Sephadex G – 100 đã tách được hai phân đoạn EPS I và EPS II. EPS II cho kết quả khả năng gây độc tế bào ung thư gan Hep-G2 (32,38 ± 3,65 μg/ml) tốt hơn EPS I. Chúng tôi xác định được thành phần monosaccharide trong phân đoạn EPS I và EPS II đều chứa glucose, fructose và mannose theo tỷ lệ mol lần lượt là 1:1:1 và 2:1:1. Kết luận, chúng tôi đã xây dựng quy trình tinh sạch exopolysaccharide từ nấm O. sinensis bổ sung dầu ô liu có hoạt tính sinh học được cải thiện đáng kể.

Exopolysaccharide; Ophiocordyceps sinensis; Dầu ô liu; Hoạt tính sinh học

24 Lý Thường Kiệt, Hà Nội

HCM-0039-2018